细管电泳技术简介 毛细管电泳（CE）又称高效毛细管电泳（HPCE），是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力，根据样品中各组分之间迁移速度和分配行为上的差异而实现分离的一类液相分离技术。它较早地使分析科学从微升水平提升至纳升水平，并使细胞分析，乃至单分子分析成为可能，是分析科学中继高效液相色谱之后的又一重大进展。 图1：毛细管电泳原理示意图 目前，全球以CE技术为核心每年发表的文章数以千计。国内外众多厂家积极投身于毛细管电泳相关仪器的研制和生产，并取得一定进展，例如ProteinSimple、SCIEX、安捷伦、永道致远、CMP质谱科技公司等。 图2：19902023年每年发表与CE相关的文献数量（来源：pubmed） cIEF模式诞生 上世纪80年代以来，CE技术曾经百花齐放，多种分离模式不断涌现。较为人熟知的有CZE、CGE、MEKC等模式。1985年，Hjertn和Zhu在毛细管电泳仪上首次实现cIEF。与平板胶IEF相比，clEF具有自动化程度高和可定量等优点。 但经过十几年发展，作为蛋白质药物电荷异质性表征方法，cIEF并没有被制药行业领域广泛接受。主要是因为通用的商业化毛细管电泳仪器只配备了单点紫外吸收和荧光检测器，使运行clEF方法很有挑战性。IEF分离过程后，依靠化学和压力方式移动毛细管内聚焦的蛋白条带，使其经过单点检测器，这个迁移方式可能会产生问题，如峰形扭曲、模糊或分辨率不佳，需要增加运行时间，并且方法优化具有挑战性。而且，分离柱内部发生聚焦和迁移步骤无法被观察到，不易优化。 icIEF具备关键优势 1992年和1994年ProteinSimple科学家Wu和Pawliszyn首次提出了基于反射指数和紫外吸收的全柱成像检测技术，并于1998年首次商业化全柱成像紫外吸收cIEF，称为icIEF。icIEF横空出世，在一定程度上弥补了传统毛细管等电聚焦电泳的缺陷。 icIEF具有方法开发简单、通量高、等电点（pI）测定和定量重现性好、易于开发平台方法等优点。去除了传统clEF迁移步骤，将分析时间从40到60分钟减少到每个样品5到15分钟。icIEF方法每次进样分析时间短，并能够实时观察整个聚焦过程，很容易地识别出峰型不重现的原因，如蛋白质聚集情况下，可以通过优化聚焦时间或添加稳定剂来避免。icIEF技术成功商业化后，已经逐渐取代传统的cIEF技术，该方法由于性能优异还收录于2020版最新药典，在生物制药行业得到了广泛应用。 MauriceFlex震撼上市 ProteinSimple旗下Maurice全自动蛋白质表征系统是生物大分子蛋白药物分子量大小和电荷变异体检测的金标准。采用免组装卡盒设计与创新性实时全柱成像等电聚焦专利技术，同时具备CESDS和icIEF两种检测模式的毛细管电泳，双模式符合2020版中国药典。 电荷变化是测定抗体药物降解变异最灵敏快速的方法之一。基于icIEF（全柱成像毛细管等电聚焦）技术，用户使用Maurice10分钟即可获得高分辨率和高重复性的蛋白质电荷变异体数据。 CESDS（十二烷基硫酸钠毛细管电泳）是治疗性生物大分子蛋白质大小和纯度检测重要手段。由于CESDS检测不需要对结果进行二次处理，所以其结果较SDSPAGE更加精确稳定和客观。 目前生物制药客户对于电荷变异体的表征主要通过色谱分离后接收集馏分，除盐和冻干后，使用质谱进行分析。但是，色谱对于单抗以外的蛋白类药物分辨率不高，方法开发复杂。日常开发中，研发人员常常面临LC谱图和icIEF谱图无法对应的窘境，因此用户急需更优质的技术来满足需求。 2023年1月，ProteinSimple正式发布MauriceFlex全自动毛细管电泳分析与组分收集系统。MauriceFlex采用了最新技术，实现在icIEF检测中对多种类型样品进行分离和制备回收。MauriceFlex集多功能于一体，支持CESDS、TurboCESDS、icIEF检测以及icIEF组分收集多种模式，进一步创新和简化蛋白质表征工作流程。 毛细管电泳的未来普及应用展望 自上世纪80年代问世以来，毛细管电泳已逐渐发展成为一种成熟而可靠的分离制备技术。与凝胶电泳、液相色谱等传统分离技术相比，毛细管电泳具有体积小、分离速度快、分辨率高、效率高、样品和溶剂消耗低等优点。因此，毛细管电泳已广泛应用于生物药开发、医学研究、法医调查、环境监测、食品质量检测等领域。 目前生物制药中以单抗为代表的的大分子药物、小分子药物、PROTAC以及细胞基因治疗已逐渐崛起，毛细管电泳作为一种必备的蛋白质药物表征手段，已经步入黄金时代。随着icIEF方法写入药典，MauriceFlex重磅上市进一步完善蛋白质电荷表征等里程碑事件，她将进入更多生物制药企业的研发和生产。 2023年3月15日13：3017：15，为了加深用户对创新技术的理解，促进大分子药物研发和质量分析领域交流和合作，回馈广大用户的支持，ProteinSimple和药融圈在广州联合举办蛋白质表征及分析培训会。本次会议将邀请多位生物制药企业和CDMO行业技术专家分享各自领域的工作成果，提供学习交流机会，诚挚邀请您的光临。 蛋白质表征及分析培训会 13：3013：45 开场致辞 赵维涛，ProteinSimple，中国区工业客户负责人 13：4514：15 现代分析技术在生物制品质量控制中的应用 梁蔚阳，广东省药检所，生物制品室负责人 14：1514：45 icIEF在重组新型冠状病毒融合蛋白疫苗的应用 李小翠，丽珠生物，电泳分析经理 14：4515：15 双特异抗体质量分析 欧阳东，汉腾生物，理化分析经理 15：1515：45 茶歇观展 15：4516：15 腺相关病毒（AAV）质控要点及相关表征 谭玲，派真生物，QC经理 16：1516：45 CESDS方法及效率优化 翁祖森，ProteinSimple，技术支持 16：4517：15 重磅发布MauriceFlex全自动毛细管电泳分析与组分收集系统 杜颖颖，ProteinSimple，技术支持经理
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