化妆品舒缓功效评估

　　舒缓，在《化妆品分类规则和分类目录》中的释义是：有助于改善皮肤刺激等状态。皮肤受到刺激后若表现出高反应状态，即刺痛、灼热等主观症状或出现红斑、毛细血管扩张等客观体征，则极有可能为敏感性皮肤。
　　One
　　功效型护肤品与敏感肌护理产品
　　针对敏感皮肤许多公司推出了药妆，但在国内，法律意义上并没有药妆这个概念，药妆更确切来说，是指功效型护肤品（指具备能够改变皮肤结构的特殊功效的护肤品），其中有一部分为敏感肌适用，兼具安全性与功效性，称作敏感肌护理类产品，也叫作皮肤学级产品。
　　而据欧睿国际数据显示，2014年2019年，皮肤学级护肤品市场年均复合增长率达到23。2。2019年时，中国皮肤学级护肤品市场规模为332亿元，占整体护肤品市场的13。6，预计到2024年市场规模将达1010亿元，占整体护肤品市场的22。9。一方面，环境变差、生活压力变大和不当的护肤习惯，会导致皮肤敏感发生的情况越来越多，另一方面，随着人们收入和教育水平的提升，对护肤逐渐重视，针对皮肤敏感时期护理产品的市场规模也会逐渐增大。
　　Two
　　皮肤敏感发生原因
　　皮肤敏感的发生是一种涉及皮肤屏障皮肤神经系统皮肤免疫细胞的复杂过程。在内在和外在因素的共同作用下，皮肤屏障功能受损，引起感觉神经传入信号增加，导致皮肤对外界刺激的反应性增强，引发皮肤免疫炎症反应。
　　Three
　　基于2D细胞的舒缓功效体外评价方法
　　01hr基于神经元细胞
　　神经细胞在受到刺激时，膜电位会在原本的静息电位基础上转为可扩布的电位变化过程，这个过程被称为动作电位，动作电位的变化是神经反应的主要体现，峰电位是动作电位的主要组成成分，因此通常意义上的动作电位往往指峰电位。
　　通过检测膜电位变化可以评价待测物对神经元动作电位的影响，从而评价待测物的舒缓功效。
　　02hr基于角质形成细胞
　　角质形成细胞表面会表达一些能够感觉到温度、疼痛等的受体如TRP类，最典型的TRP类受体包括辣椒素受体（TRPV1），外界或内源性刺激都会激活TRPV1，从而引起Ca2内流，导致皮肤渗透性增加，产生刺痛、烧灼的感觉。同时TRPV1还会促进释放包括P物质在内的神经源性炎症因子，进一步诱导炎症因子的分子，导致局部毛细血管扩张。
　　因此我们可以通过检测TRPV1表达量、钙离子含量的变化和炎症因子，来评价待测物的舒缓功效。以TRPV1为例：
　　图2TRPV1含量检测
　　如图，绿色荧光代表TRPV1，颜色越深代表含量越高。从图中可以看出，样品组的TRPV1的含量显著降低，即可说明样品具有舒缓功效。
　　03hr基于肥大细胞
　　肥大细胞在过敏反应尤其是型过敏反应的发生中有着非常重要的地位抗体与肥大细胞结合后，肥大细胞脱颗粒释放组胺，从而产生刺激，导致血管通透性增强、毛细血管扩张等表观现象。
　　肥大细胞受到刺激后会以胞吐形式将细胞内的颗粒释放到细胞外，在细胞膜周围可明显看到。
　　通过脱颗粒细胞数的占比可以评价样品抑制肥大细胞脱颗粒的作用，样品组的脱颗粒细胞数目明显下降，即可说明样品的舒缓功效。
　　04hr基于巨噬细胞
　　脂多糖（LPS）是革兰氏阴性细菌细胞壁外壁的组成成分，它会刺激炎症介质如TNF、PGE2和COX2等的分泌。我们可以利用LPS刺激巨噬细胞造模，来评估样品的舒缓功效。
　　图3PGE2和COX2含量检测
　　如图，样品组能够显著降低PGE2和COX2的表达，即可说明样品有舒缓功效。
　　Four
　　基于3D表皮模型的舒缓功效体外评价方法
　　我们同样也可以利用3D皮肤模型，通过UVB刺激或SLS刺激Epikutis表皮模型造模，来评估样品的舒缓功效。
　　以SLS刺激为例，以地塞米松为阳性对照，通过模拟皮肤受到化学刺激时的状态，检测组织活力、模型形态学变化和炎症因子的表达量，来评估活性物的抗炎功效。
　　以这两者为例：
　　01hr组织形态
　　图4组织形态检测
　　经过SLS刺激后的皮肤模型角质层分布变得疏松（图中红色箭头部分），同时活细胞层数减少（绿色箭头部分），而样品组的角质层疏松程度明显改善，对活细胞层数也有一定的改善作用，即可说明样品具有一定的舒缓功效。
　　02hr炎症介质和炎症因子
　　在3D表皮模型Epikutis上，还可以通过检测炎症介质和因子来评价样品的舒缓功效。
　　图5欧莱雅零点霜舒缓功效评估（图源基础颜究公众号）
　　如图，样品组的各类炎症因子分泌量均显著减少，样品具有舒缓功效。
　　前期巨大的研发成本和可合作权威皮肤科医生等资源的稀缺，使得舒缓功效的护肤品未来短时间不会达到饱和，而人们对护肤的愈发重视，会让舒缓功效护肤品功效迎来巨大的增长。
　　功效评价是功效宣称的不二法门，功效为功能性护肤品立身之本，化妆品新规的颁布和施行，为所有化妆品行业从业人员带来了挑战，同样也带来了机遇。